实验介绍:
TUNEL技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性核酸内切酶被激活而将自身染色体DNA切断成缺口或3-OH末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如地高辛,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-OH末端,再用免疫组化法或免疫荧光检测凋亡细胞
实验流程:
白光: 切片脱蜡至水--蛋白酶K修复--孵育tunel反应液--孵育Streptavidin-HRP反应液-- DAB显色--苏木素染核--脱水封片--镜检拍照
荧光:脱蜡至水--蛋白酶K修复--破膜通透--孵育tunel反应液--DAPI染核--抗荧光素淬灭剂封片-- 镜检拍照
注意事项:
(1)石蜡切片:组织取样后应立即置于固定液中,常温运输切勿冷冻结冰;
(2)冰冻切片:-20度运输
实验结果展示:
Tunel 绿 Tunel 绿
Tunel 白光 Tunel 白光