实验目的：观察细胞内部细胞器的结构及变化，如线粒体，内质网，自噬体等。以下所有样本必须尽量新鲜，固定液或悬浮液都不得冷冻结冰!
样本类型 | 样品保存运输要求 |
| 动物组织样本 | ①1-3min 内取样，取样组织2mm×2mm 大小，尽量薄。固定液渗透能力有限，超出 此范围后组织会无法完全固定，后续实验无法完成，务必请重视此过程。 |
| ②取材时尽量精确到需要观察的目的部位(如观察肾小球取肾皮质；观察胰岛取胰岛丰富的 胰尾；皮肤、肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)。 | |
| ③取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤，刀片要锋利避免挫伤组织。 | |
| ④组织取下后立即投入电镜固定液内避光室温固定2h,再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在 保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。4℃时样本可保存1个月左右。 | |
| 植物组织样本 | ①取材要求同动物组织样本。 |
| ②组织投入固定液后需要进行真空抽气让组织沉底，如无条件抽气可用滤纸将组织塞进固定液 内，组织不能漂浮在固定液表面。 | |
| 细胞样本 | 贴壁细胞： |
| 方法一 ： | |
| ①培养好的细胞弃培养基，加入2.5%的常温戊二醛固定液。 | |
| ②常温避光固定5min左右，用细胞刮(或软橡胶盖切的平整小方块)沿一个方向轻轻刮下 细胞，切记不要反复刮，避免细胞刮破。 | |
| ③用巴氏吸管把细胞液吸入离心管内，放入离心机(不超过3000转),离心2min左右， 细胞团要有绿豆大小。 | |
| ④弃固定液后加新的电镜固定液，把细胞团轻轻挑起，悬浮于固定液中。 | |
| ⑤室温避光固定30min, 再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切 | |
| 勿冷冻结冰。 | |
| 方法二：(对细胞形态没有要求的) | |
| ①培养好的细胞弃培养基，加入胰酶。 | |
| ②胰酶消化好后(时间不宜过长),用培养基终止消化，用吸管把细胞吹下来。吸入离心管， 离心(不超过3000转),2min左右，细胞团要有绿豆大小。 | |
| ③弃上清，加入2.5%的常温戊二醛固定液，把细胞团轻轻挑起，悬浮于固定液中。 | |
| ④室温避光固定30min, 再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中因定液切 | |
| 勿冷冻结冰。 | |
| 悬浮细胞： | |
| 离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀绿豆大小，弃培养基后加电镜固定液室温避光固定30min, 再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。 | |
| 细菌样本 | 长于固体培养基的细菌： 将细菌连带着培养基一起挑下放于电镜固定液内室温避光固定2h, 再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。 |
| 悬浮细菌孢子等：离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀绿豆大小，弃培养基后加电镜固定液室 温避光固定2h,再转移至4℃保存，4℃冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。 | |
| 病毒 | 破碎组织细胞，粗离心去除细胞碎片取上清，超速离心分离出病毒(病毒提取的过程需要客 户自己完成)。用缓冲液(如PBS)悬浮病毒，体积至少50μL,远距离干冰冻存运输，近距 离4℃保存运输，尽快滴片做负染后及时电镜观察拍照。 |
| 外秘体囊泡等 | 客户自己完成外泌体囊泡等的提取收集，用缓冲液(如PBS)或者试剂盒中的保存液悬浮，体 积至少50μL,远距离干冰冻存运输， 近距离4℃保存运输，尽快制片做负染后及时电镜观察 拍照(因此类样品极易降解，样品越新鲜越好，最好数小时内完成滴片负染，否 则做出的效 果很不理想甚至完全观察不到)。 |
| 纳米材料等无机材料 | 直接准备粉剂或用缓冲液(如PBS)悬浮，常温保存运输即可(需要超声的备注)。做负染后 电镜观察拍照。 |
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