原位杂交样本准备方法及要求

作者：admin2025-03-14 08:46 热度：69

样本类型	取样及运输要求
组织冰冻切片	1.组织取出后，切取需要部位，厚度不要太厚，2mm左右，用PBS漂洗干净，干冰运输或立即置于固定液中，室温固定12h以上 (根据组织大小)。	1.新鲜组织干冰运输； 2.标本放原位杂交固定液中，常温运输； 3.冰冻切片-20℃运输；
	2.固定液有原位杂交固定液(动物)、原位杂交固定液(植物)。
	3.植物组织固定时需常温抽真空30min,倒掉固定液，用纯水或PBS清洗两次后，放入15%蔗糖溶液中4℃脱水8h,接着换30% 蔗糖溶液4℃过夜。
	4.冰切时佩戴手套，冰冻切片放-20℃或-80℃保存备用。
组织石蜡切片	1.组织取出后，切取需要部位，厚度不要太厚，2mm左右，用 PBS漂洗干净后立即固定。	1.标本放原位杂交固定液中，常温运输； 2.石蜡切片常温运输
	2.动物组织用原位杂交固定液(动物),植物组织用原位杂交固定液 (植物)或原位杂交固定液(较嫩植物)。
	3.植物组织固定时需常温抽真空30min,固定12h以上。
	4.固定完成后脱水、包埋、切片(梯度酒精配制需用DEPC水，石蜡常规保存备用)。

注：1.以上所有样本必须尽量新鲜，固定液或悬浮液都不得冷冻结冰。

2.DEPC 水配制：纯水中加入0.1%DEPC 原液震荡搅拌2h,静置过夜后高压灭菌30min 以上，或直接购买。

保存运输方法